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其他沙門(mén)菌感染

其他沙門(mén)菌感染 的檢查:

沙門(mén)氏菌的鑒定

1.血象 外周血液白細(xì)胞數(shù)多在正常范圍,亦有增高或降低者。當(dāng)發(fā)生局部化膿性感染時(shí),血液白細(xì)胞數(shù)多升高;而酷似傷寒型者則常降低。
2.細(xì)菌培養(yǎng) 胃腸炎型可從嘔吐物、糞便、可疑食物中培養(yǎng)、分離出病原菌。其中,以鼠傷寒沙門(mén)菌、腸炎沙門(mén)菌、豬霍亂沙門(mén)菌、病牛沙門(mén)菌和鴨沙門(mén)菌感染較為常見(jiàn)。有研究表明,直腸拭子培養(yǎng)的陽(yáng)性率較高。傷寒型、敗血癥型可從血液中培養(yǎng)、分離得病原體。一些病例可從局部化膿性病灶或分泌物中培養(yǎng)、分離出病原菌。對(duì)急性胃腸炎患者,可將其糞便標(biāo)本同時(shí)接種于強(qiáng)選擇性SS瓊脂培養(yǎng)基和弱選擇性麥康凱培養(yǎng)基上,置37℃過(guò)夜后再挑取不發(fā)酵乳糖的可疑菌落,接種于三糖鐵培養(yǎng)基上培養(yǎng),并作血清學(xué)分型。對(duì)已經(jīng)用抗菌藥物治療或處于疾病后期的患者,由于其糞便中的沙門(mén)菌數(shù)量已經(jīng)較少,用上述直接培養(yǎng)法有時(shí)會(huì)出現(xiàn)假陰性結(jié)果。為了提高培養(yǎng)的陽(yáng)性率,可采用0.5%亞硒酸肉湯或四硫磺酸鹽肉湯作為增菌劑,將1g左右的大便標(biāo)本接種于10ml增菌劑中,置37℃過(guò)夜,然后再轉(zhuǎn)種于上述培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。北京市防疫站介紹用磷酸鹽緩沖蛋白胨水作為增菌培養(yǎng)基,接種標(biāo)本后置37℃,培養(yǎng)5~6h即能達(dá)到明顯增菌的效果。不同血清型的沙門(mén)菌在各種選擇性增菌培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)能力有較大的差異,目前尚沒(méi)有一種理想的增菌培養(yǎng)基,使各種沙門(mén)菌在其中都能達(dá)到增菌的效果。如0.5%亞硒酸肉湯可對(duì)鼠傷寒沙門(mén)菌、乙型副傷寒沙門(mén)菌等有良好的增菌效果,而對(duì)豬霍亂沙門(mén)菌、羊流產(chǎn)沙門(mén)菌等卻有抑制生長(zhǎng)的作用。在選擇性增菌培養(yǎng)時(shí),提高培養(yǎng)溫度,達(dá)到43℃,培養(yǎng)18~24h,除傷寒沙門(mén)菌外,一般都能明顯增強(qiáng)增菌培養(yǎng)基的選擇效果,對(duì)大腸桿菌、變形桿菌、假單胞菌和不發(fā)酵乳糖的非致病菌都有較強(qiáng)的抑制作用,使在培養(yǎng)平板上出現(xiàn)較純的菌落,更易于作進(jìn)一步菌種分離與鑒定。從血液、尿液和膿液等標(biāo)本中分離沙門(mén)菌的方法與從糞便標(biāo)本中分離沙門(mén)菌的方法基本相同。自血液中分離沙門(mén)菌可抽取病人的靜脈血5ml,立即接種于50~100ml的0.5%~1%葡萄糖膽汁肉湯或葡萄糖肉湯增菌液中,置37℃培養(yǎng),每天用鉑金環(huán)挑取增菌液接種于選擇性培養(yǎng)基或血液瓊脂培養(yǎng)基上,一般連續(xù)接種3天,必要時(shí)可連續(xù)接種2周。自尿液、痰液、漿膜腔液、膿液中分離沙門(mén)菌,可先將標(biāo)本離心,3000r/min,15min,取沉淀作直接培養(yǎng)分離或經(jīng)增菌培養(yǎng)后再作分離培養(yǎng)。國(guó)內(nèi)外用于分離沙門(mén)菌的培養(yǎng)基種類(lèi)很多,但均無(wú)法從菌落形態(tài)上將沙門(mén)菌屬與變形桿菌屬、枸櫞酸桿菌屬識(shí)別開(kāi)來(lái)。鄧滌夷等研制了一種新的沙門(mén)菌分離培養(yǎng)基,乳糖賴(lài)氨酸十二烷基硫酸鈉瓊脂Ⅱ(LLSⅡ)培養(yǎng)基。沙門(mén)菌(除甲型副傷寒沙門(mén)菌外)均能在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng),并能形成中心黑色邊緣紅色或橙黃色特征性菌落,而變形桿菌屬和枸櫞酸桿菌屬的細(xì)菌因產(chǎn)生硫化氫(H2S)的特征被抑制而形成黃色菌落,因而,從菌落形態(tài)上就可以把干擾沙門(mén)菌分離的產(chǎn)生硫化氫的非沙門(mén)菌區(qū)分開(kāi)來(lái)。沙門(mén)菌的鑒定較為復(fù)雜。目前世界上已發(fā)現(xiàn)2000多個(gè)血清型,我國(guó)已發(fā)現(xiàn)201個(gè)血清型,新的血清型還在不斷地被發(fā)現(xiàn)。常先用抗血清作“O”抗原鑒定,再用抗血清作“H”抗原鑒定。近年來(lái),還用噬菌體裂解試驗(yàn)、DNA雜交和聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)等技術(shù)作沙門(mén)菌的血清型鑒定。
3.血清學(xué)檢查 可用患者的血清與已知的沙門(mén)菌菌種制成的菌體抗原或亞單位抗原作凝集試驗(yàn)或酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA),以檢測(cè)血清中是否含有特異性抗體。一般于發(fā)病1~2周后即出現(xiàn)較高的抗體效價(jià)。若雙份血清檢查,第2次效價(jià)有4倍或以上增高者,可明確診斷為本病。但是,由于一般臨床檢驗(yàn)室的沙門(mén)菌抗原種類(lèi)有限,故較易出現(xiàn)漏檢現(xiàn)象。作某種沙門(mén)菌特異性抗原檢測(cè)更有助于明確診斷。如Keller等建立了2株能分泌腸炎沙門(mén)菌IgG抗體的小鼠雜交瘤細(xì)胞,用制備的單克隆抗體作ELISA,檢測(cè)標(biāo)本中的腸炎沙門(mén)菌,具特異性強(qiáng)、敏感度高之優(yōu)點(diǎn)。標(biāo)本中只要有10條病原菌即可呈檢測(cè)陽(yáng)性。
4.分子生物學(xué)檢測(cè) 近年來(lái),已有用DNA探針和PCR檢測(cè)沙門(mén)菌DNA的報(bào)道。而且,初步顯示PCR檢測(cè)有較高的特異性和敏感度。
如關(guān)節(jié)積液中可測(cè)得病原菌。

 

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