熒光法密螺旋體抗體吸附試驗概述
熒光密螺旋體抗體吸收試驗(FTA-ABS)是一種間接熒光抗體法。試驗前先用Reiter密螺旋體超聲波裂解物處理病人血清,除去其中具有交叉反應(yīng)的抗體后,再與梅毒螺旋體作用,然后加用熒光素標(biāo)記的抗人IgG。此法敏感性高、特異性強(qiáng),能最早檢測出梅毒螺旋體的特異性抗體。但操作復(fù)雜,且病人經(jīng)過藥物治療后反應(yīng)仍持續(xù)陽性。因此,不適于判斷療效。如需判定療效,可參考血清反應(yīng)素試驗結(jié)果。
熒光法密螺旋體抗體吸附試驗正常值
陰性。
熒光法密螺旋體抗體吸附試驗臨床意義
陽性:梅毒性心血管病。
熒光法密螺旋體抗體吸附試驗檢查方法
(1)用吸收劑對經(jīng)56℃水浴30min滅活的被檢血清作1∶5稀釋,充分混勻。
(2)加0.03ml分別用PBS和吸收劑作1∶5稀釋過的非特異性控制血清于固著抗原螺旋體的玻片反應(yīng)圈內(nèi)。此為陰性對照。
(3)加0.03ml經(jīng)吸收劑作1∶5稀釋過的最小反應(yīng)性(+)控制血清于玻片反應(yīng)圈內(nèi)。此為陽性對照。
(4)加0.03ml經(jīng)吸收劑作1∶5稀釋過的被檢血清于玻片反應(yīng)圈內(nèi)。
(5)將此玻片置于濕盒內(nèi),36℃±1℃,保溫30min。
(6)將玻片置于玻片架上,用PBS(pH值7.2±0.1)沖淋玻片5s,然后浸入此PBS中5min。再拎出、浸沒玻片,濯洗30次。
(7)用已經(jīng)120℃ 15min消毒的蒸餾水沖淋5min。用吸水紙輕輕將玻片吸干。
(8)加0.03ml異硫氰酸熒光素標(biāo)記的抗人IgG(FITC-標(biāo)記抗人IgG)于每個反應(yīng)圈內(nèi)。重復(fù)5~7步驟。
(9)加固定液1小滴于玻片上,再復(fù)上蓋玻片,切勿形成氣泡。
(10)將玻片置熒光顯微鏡下,先用鎢燈為光源,在暗視野下尋找Nichols螺旋體。然后改用高壓汞燈,經(jīng)濾光片選取紫外光段即可觀看熒光結(jié)果。讀片應(yīng)在4h內(nèi)完成。
熒光法密螺旋體抗體吸附試驗注意事項
本試驗敏感性和特異性均高,在早期梅毒首先出現(xiàn)陽性,常被用作確證試驗。