單純皰疹病毒性角膜炎別名:單純皰疹病毒性角膜炎
單純皰疹病毒性角膜炎 的檢查:
1.血清學(xué)診斷 血清學(xué)檢查作為回顧性診斷,雖可用于臨床,但因病毒抗原具有多種不同的抗原決定簇,致使血清中多種抗體混合存在,檢測時非特異性增強,常易存在假陽性結(jié)果。且中和抗體及補體結(jié)合試驗,往往不適合復(fù)發(fā)病例,因90%的成年人血清中均有一定水平的抗HSV抗體。即使在復(fù)發(fā)感染階段,其抗體水平也未必升高,故實用意義不大。
2.檢測包涵體及多核巨細(xì)胞 病灶刮片和組織切片用普通染色法檢測嗜酸性核內(nèi)包涵體和多核巨細(xì)胞。如陽性則對臨床診斷有很大支持。此法僅能證實病毒感染而不能區(qū)分是否HSV感染。電鏡技術(shù)雖然可以更好地看到病毒顆粒的存在,但其取材繁瑣,對病毒顆粒濃度要求高,常需106~107顆粒/ml,而且電鏡設(shè)備昂貴,需一定經(jīng)驗、特殊培養(yǎng)的人員,診斷價值較低,不宜廣泛采用。
3.病毒培養(yǎng) 刮取角膜潰瘍邊緣組織,進行小白鼠接種或雞胚囊膜培養(yǎng)或組織培養(yǎng),不但可分離出病毒,而且還可鑒定出病毒類型。但病毒培養(yǎng)并非易事,且僅適用于上皮型HSK,對于基質(zhì)型、內(nèi)皮型HSK都很難培養(yǎng)出病毒。
4.免疫技術(shù)
(1)免疫熒光法:又稱熒光素抗體抗體法,是一種抗原抗體結(jié)合反應(yīng)與形態(tài)學(xué)相結(jié)合的方法。即把抗體標(biāo)記上熒光素,使與相應(yīng)的抗原相結(jié)合,然后在熒光顯微鏡下觀察顯示熒光的抗原-抗體復(fù)合物。此法能快速地將組織或細(xì)胞內(nèi)的病原體或其他抗原成分加以鑒別和定位。
(2)免疫酶染色法(immunoenzymatic staining):其基本原理和過程與免疫熒光法基本相似,不同之處是用酶來標(biāo)記抗體球蛋白。常用的是辣根過氧化物酶,分子量40000Da,為一種酶蛋白,與底物發(fā)生組織化學(xué)反應(yīng)后,可產(chǎn)生有顏色的沉淀物質(zhì)。由于其是電子致密物質(zhì),用其代替熒光素來標(biāo)記抗體球蛋白,不僅能在普通光學(xué)顯微鏡下觀察,也可用電子顯微鏡進行分子水平的觀察。此法簡單,從刮片到觀察結(jié)果僅需3h左右,普通光學(xué)顯微鏡即可檢測,因此具有迅速、簡便易行的優(yōu)點。
(3)放射免疫測定法:是一發(fā)展迅速的免疫學(xué)檢查方法,又稱核素標(biāo)記法。其原理是用放射性核素(如125I或131I)標(biāo)記抗體(或抗原),再使抗體抗原相結(jié)合,以達(dá)檢測抗原(或抗體)的目的。
5.聚合酶鏈反應(yīng)(PCR) 是一種在體外將特異性DNA序列進行高效擴增的方法。應(yīng)用PCR法檢測生物標(biāo)本中病毒的特點有:
(1)可以從極少拷貝數(shù)的病毒DNA序列擴增需要的片段,從而大大提高檢測的靈敏度。
(2)整合入細(xì)胞內(nèi)的病毒基因,往往處于潛伏期,它并不表達(dá),因此不能用免疫方法查到,但PCR可以使這一基因片段中的特定部分?jǐn)U增到易于檢測的程度。
PCR技術(shù)具有特異性強、靈敏度高、自動化操作等優(yōu)點,因此在臨床疾病的病因診斷方面顯示出極大的優(yōu)勢,對HSK檢測HSV DNA有良好的應(yīng)用前景。
6.免疫組織化學(xué)檢查 使用HSV-1的單克隆抗體診斷藥盒,進行包括免疫熒光染色和酶免疫測定,能在少于4h內(nèi)對上皮刮片作病原學(xué)快速診斷,結(jié)果極為可靠。
7.其他
(1)樹枝狀角膜炎:2%熒光素染色,呈明顯樹枝狀淡綠色著色,故稱樹枝狀角膜炎。
(2)地圖狀角膜炎:病變潰瘍邊緣不整齊,呈灰白色地圖狀或阿米巴形。
(3)盤狀角膜炎:角膜表面粗糙,呈顆粒狀水腫或上皮完整。而基質(zhì)層則由于浸潤、水腫而增厚,呈毛玻璃樣灰色混濁。病變區(qū)多位于角膜中央,呈盤狀,境界清楚。有時可表現(xiàn)為基質(zhì)的彌漫性浸潤。后彈力層出現(xiàn)皺襞,內(nèi)皮有水腫;有較多灰色帶色素斑點狀角膜后沉降物(K、P)。
無其他特殊輔助檢查手段。
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