淚液乳酸脫氫酶概述
淚液中的LDH(EC1.1.1.27)和MDH(EC1.1.1.37)主要來(lái)自眼角膜上皮。它們?cè)跍I液中的濃度約為血清中該酶濃度的20倍。淚LDH主要含M亞基,以L(fǎng)DH5和LDH4含量最高。淚液MDH同工酶,用醋纖膜電泳,可分離出MDHs和MDHm,健康人淚液以MDHs為主。
淚液乳酸脫氫酶正常值
LDH1.29~9.02U/L;
LDH同工酶LDH10.66±0.51%;
MDH活性0.25~2.2U/L;
MDH同工酶MDHs80%~98.1%;
以MDHm>20%為異常;
LDH/MDH<69歲者3.96±0.7;
>70歲者4.55±0.51。
淚液乳酸脫氫酶臨床意義
異常結(jié)果在細(xì)菌性角膜潰瘍和角結(jié)膜化學(xué)傷時(shí),淚LDH和MDH活性下降。凡角結(jié)膜上皮損傷,LDH同工酶H/M比值和MDHm均有不同程度升高,但MDHm更能反映角膜組織損害的情況和病變程度。如在角膜潰瘍和可疑干性角結(jié)膜炎(KCS),MDHm升高而淚LDH的H/M比值卻無(wú)顯著變化。
淚LDH同工酶和LDH/MDH比值的測(cè)定有助于沙眼和慢性結(jié)膜炎的鑒別診斷。兩者淚液LDH的H/M比值均明顯下降,但沙眼時(shí),淚液LDH/MDH比值無(wú)變化,而且LDH的M亞基升高更顯著。
需要檢查人群角膜疾病的診斷。
淚液乳酸脫氫酶檢查方法
1、比色法:
(1)乳酸鉀、乳酸鈉也可作為L(zhǎng)DH底物,但因其為水溶液,含量不夠準(zhǔn)確,且保存不當(dāng)易產(chǎn)生酮酸類(lèi)物質(zhì),抑制酶促反應(yīng)。而乳酸鋰為固體,穩(wěn)定,易于稱(chēng)量。
(2)除二乙醇胺緩沖液外,也可用Tris或焦磷酸緩沖液,避免了原金氏法中甘氨酸緩沖液對(duì)LDH的抑制作用,提高了陽(yáng)性檢出率。
(3)比色應(yīng)在5~15min內(nèi)完成,否則吸光度降低。
(4)結(jié)果>2500U時(shí),可用生理鹽水稀釋標(biāo)本后再測(cè),其結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。
2、連續(xù)監(jiān)測(cè)法:
(1)標(biāo)本勿溶血,當(dāng)溶血達(dá)Hb 0.8g/L時(shí),LDH活性可升高58%。
(2)標(biāo)本于室溫(25℃)保存,2天內(nèi)酶活性穩(wěn)定,冰箱保存酶活性降低,-20℃過(guò)夜LDH3、LDH4則全部失活。
(3)用血清或肝素抗凝血漿測(cè)定結(jié)果滿(mǎn)意,草酸鹽可抑制LDH活性。
(4)復(fù)溶后溶液變濁或初始吸光度>0.5應(yīng)棄去。
(5) 利用正逆雙向反應(yīng)均可測(cè)定乳酸脫氫酶活性,但因反應(yīng)溫度、底物和緩沖液濃度不同,其參考區(qū)間也有差異。以乳酸和NAD為底物,在340nm監(jiān)測(cè)吸光度增高速率為正向反應(yīng),以L(fǎng)D-L表示;以丙酮酸和NADH為底物,監(jiān)測(cè)340nm吸光度下降速率為逆向反應(yīng),以L(fǎng)D-P表示。正逆反應(yīng)兩法相比,LD-L法的主要優(yōu)點(diǎn)是:A.正向反應(yīng)底物液的穩(wěn)定性比逆向反應(yīng)的穩(wěn)定性大,前者冰箱可保存6個(gè)月以上,而后者僅幾天;B.速率反應(yīng)的線(xiàn)性范圍(吸光度對(duì)監(jiān)測(cè)時(shí)間t作圖)較寬;C.重復(fù)性比LD-P好。由于逆向反應(yīng)速度比正向反應(yīng)速度快,其參考值約為L(zhǎng)D-L的2倍。
淚液乳酸脫氫酶注意事項(xiàng)
不合宜人群:一般無(wú)特殊人群。
檢查前禁忌:用手揉眼睛,這樣會(huì)使眼睛感染,加重病情,影響檢查效果。
檢查時(shí)要求:配合醫(yī)生指示做好相關(guān)檢查。