淚液乳酸脫氫酶概述
淚液中的LDH(EC1.1.1.27)和MDH(EC1.1.1.37)主要來自眼角膜上皮。它們在淚液中的濃度約為血清中該酶濃度的20倍。淚LDH主要含M亞基,以LDH5和LDH4含量最高。淚液MDH同工酶,用醋纖膜電泳,可分離出MDHs和MDHm,健康人淚液以MDHs為主。
淚液乳酸脫氫酶正常值
LDH1.29~9.02U/L;
LDH同工酶LDH10.66±0.51%;
MDH活性0.25~2.2U/L;
MDH同工酶MDHs80%~98.1%;
以MDHm>20%為異常;
LDH/MDH<69歲者3.96±0.7;
>70歲者4.55±0.51。
淚液乳酸脫氫酶臨床意義
異常結果在細菌性角膜潰瘍和角結膜化學傷時,淚LDH和MDH活性下降。凡角結膜上皮損傷,LDH同工酶H/M比值和MDHm均有不同程度升高,但MDHm更能反映角膜組織損害的情況和病變程度。如在角膜潰瘍和可疑干性角結膜炎(KCS),MDHm升高而淚LDH的H/M比值卻無顯著變化。
淚LDH同工酶和LDH/MDH比值的測定有助于沙眼和慢性結膜炎的鑒別診斷。兩者淚液LDH的H/M比值均明顯下降,但沙眼時,淚液LDH/MDH比值無變化,而且LDH的M亞基升高更顯著。
需要檢查人群角膜疾病的診斷。
淚液乳酸脫氫酶檢查方法
1、比色法:
(1)乳酸鉀、乳酸鈉也可作為LDH底物,但因其為水溶液,含量不夠準確,且保存不當易產(chǎn)生酮酸類物質(zhì),抑制酶促反應。而乳酸鋰為固體,穩(wěn)定,易于稱量。
(2)除二乙醇胺緩沖液外,也可用Tris或焦磷酸緩沖液,避免了原金氏法中甘氨酸緩沖液對LDH的抑制作用,提高了陽性檢出率。
(3)比色應在5~15min內(nèi)完成,否則吸光度降低。
(4)結果>2500U時,可用生理鹽水稀釋標本后再測,其結果乘以稀釋倍數(shù)。
2、連續(xù)監(jiān)測法:
(1)標本勿溶血,當溶血達Hb 0.8g/L時,LDH活性可升高58%。
(2)標本于室溫(25℃)保存,2天內(nèi)酶活性穩(wěn)定,冰箱保存酶活性降低,-20℃過夜LDH3、LDH4則全部失活。
(3)用血清或肝素抗凝血漿測定結果滿意,草酸鹽可抑制LDH活性。
(4)復溶后溶液變濁或初始吸光度>0.5應棄去。
(5) 利用正逆雙向反應均可測定乳酸脫氫酶活性,但因反應溫度、底物和緩沖液濃度不同,其參考區(qū)間也有差異。以乳酸和NAD為底物,在340nm監(jiān)測吸光度增高速率為正向反應,以LD-L表示;以丙酮酸和NADH為底物,監(jiān)測340nm吸光度下降速率為逆向反應,以LD-P表示。正逆反應兩法相比,LD-L法的主要優(yōu)點是:A.正向反應底物液的穩(wěn)定性比逆向反應的穩(wěn)定性大,前者冰箱可保存6個月以上,而后者僅幾天;B.速率反應的線性范圍(吸光度對監(jiān)測時間t作圖)較寬;C.重復性比LD-P好。由于逆向反應速度比正向反應速度快,其參考值約為LD-L的2倍。
淚液乳酸脫氫酶注意事項
不合宜人群:一般無特殊人群。
檢查前禁忌:用手揉眼睛,這樣會使眼睛感染,加重病情,影響檢查效果。
檢查時要求:配合醫(yī)生指示做好相關檢查。