羊水細(xì)胞培養(yǎng)染色體檢查概述

由于有害化學(xué)物質(zhì)、X線照射、環(huán)境因素影響，高齡妊娠，近親配婚等，導(dǎo)致妊娠時(shí)染色體的數(shù)目、形態(tài)、結(jié)構(gòu)及結(jié)合上發(fā)生變異所引起的疾病。羊水細(xì)胞的染色體檢查，對(duì)染色體疾病的產(chǎn)前診斷具有很大的特異性意義。

• 檢查部位 腹部
• 科室 婦產(chǎn)科
• 相關(guān)疾病 小兒唐氏綜合征 流產(chǎn) 早產(chǎn) 小兒帕套綜合征 小兒貓叫綜合征 小兒先天性卵巢發(fā)育不全 難產(chǎn) 破水 過(guò)期妊娠 小兒先天性睪丸發(fā)育不全 迪格奧爾格綜合征 自然流產(chǎn) 小兒腦癱 小兒腦性癱瘓 遺傳病 母兒血型不合溶血病 Ehler-Danlos綜合征
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• 相關(guān)癥狀 水平掌褶紋(通貫手) 產(chǎn)后出血 陰囊腫大 男子性功能障礙 陰道出血 絕經(jīng) 月經(jīng)量多 耳朵位置低 染色體畸形 流產(chǎn) 頜小
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羊水細(xì)胞培養(yǎng)染色體檢查正常值

• 染色體總數(shù)46條。
  常染色體22對(duì)(序號(hào)為1~22)。
  性染色體男性為XY，女性為XX。
  男性核型46，XY。
  女性核型46，XX。

羊水細(xì)胞培養(yǎng)染色體檢查臨床意義

• 染色體數(shù)量異常如唐氏綜合征(21三體綜合征)、18三體綜合征、13三體綜合征、8三體綜合征、22三體綜合征、先天性睪丸發(fā)育不全綜合征、XXY綜合征、特納綜合征、X三體綜合征和多X體綜合征等。
  染色體結(jié)構(gòu)異常如4p部分單體綜合征、5p部分單體綜合征、9p部分三體綜合征、9q部分單體綜合征、21q部分單體綜合征、22q部分單體綜合征、22q部分三體綜合征等。

羊水細(xì)胞培養(yǎng)染色體檢查檢查方法

• (1)取孕期16～20周羊水15～30ml，1000r/ml離心10min。
  (2)棄去多余上清液，留1ml羊水和沉淀細(xì)胞，輕輕打散成細(xì)胞懸液。
  (3)移入25ml方形培養(yǎng)瓶中，加pH6.5～6.8(含青霉素100U/ml，鏈霉素100μg/ml)的培養(yǎng)基3ml及小牛血清1ml，置37℃溫箱中培養(yǎng)。
  (4)培養(yǎng)7～10天后可見大量成纖維樣或上皮樣細(xì)胞集落。此時(shí)可調(diào)換新鮮培養(yǎng)液。
  (5)待細(xì)胞集落擴(kuò)大成片，并有許多透亮的圓形分裂細(xì)胞時(shí)，即可加入秋水仙素，使最終濃度為0.1～0.3μg/ml，置37℃溫箱中再培養(yǎng)5～6h(上述過(guò)程均在無(wú)菌條件下進(jìn)行)。收獲標(biāo)準(zhǔn)：①以成纖維細(xì)胞為主要類型，成片細(xì)胞生長(zhǎng)；②以10倍目鏡和20倍物鏡觀察，生長(zhǎng)的細(xì)胞克隆覆蓋1個(gè)或1個(gè)以上完整視野；③見到10個(gè)以上透亮的圓形細(xì)胞和10個(gè)以上雙圓形光亮的分裂細(xì)胞。
  (6)如果細(xì)胞生長(zhǎng)不旺盛，生長(zhǎng)周期不齊或細(xì)胞老化，未達(dá)收獲標(biāo)準(zhǔn)，可在原瓶繼續(xù)傳代培養(yǎng)。方法：在無(wú)菌條件下先倒去培養(yǎng)液，加入2.5g/L無(wú)菌胰蛋白酶液數(shù)滴，搖動(dòng)后倒去。再加入胰蛋白酶5～10滴，在37℃下輕輕搖動(dòng)約5min，使貼壁細(xì)胞脫落。加入含小牛血清的新鮮培養(yǎng)基4ml，在37℃靜置培養(yǎng)4～5h。再小心更換培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)，一般傳代后3～5天即可收獲。
  (7)將培養(yǎng)液移至刻度離心管中，加ED-TA-胰蛋白酶液1ml于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，置37℃溫箱中5min，然后用彎頭吸管沖洗貼壁細(xì)胞(也可用2.5g/L胰蛋白酶溶液消化)。將脫離瓶壁的細(xì)胞倒入離心管中，與原培養(yǎng)液相混合，并用少量溫?zé)嵘睇}水沖洗培養(yǎng)瓶，洗下的細(xì)胞也一并倒入該離心管，以1000r/min離心10min。
  (8)吸棄上清液，加入預(yù)溫37℃的0.075mol/L KCl低滲液3～5ml，置37℃10～15min。
  (9)預(yù)固定、固定及制片均與外周血細(xì)胞染色體標(biāo)本的制備法相同。 

羊水細(xì)胞培養(yǎng)染色體檢查注意事項(xiàng)

• 1、染色體檢查須于妊娠16~20周時(shí)取羊水標(biāo)本。
  2、這些先天性遺傳病的染色體有增多、缺乏、易位、倒置等數(shù)量和結(jié)構(gòu)的異常，常表現(xiàn)為一種綜合征。如多發(fā)性畸形、生長(zhǎng)遲緩和智力缺陷等，多數(shù)導(dǎo)致胎兒流產(chǎn)、早產(chǎn)或死產(chǎn)。