混合淋巴細胞培養(yǎng)試驗概述

混合淋巴細胞培養(yǎng)試驗(mixedlymphocyteculture，MLC)是一種測定受體和供體主要組織相容性抗原(HLA抗原)相容程度的試驗方法,常用于器官移植前的組織配型。混合淋巴細胞培養(yǎng)將供者與受者的淋巴細胞做雙向混合培養(yǎng)，或者滅活供者的淋巴細胞做向混合培養(yǎng)，細胞反應的程度與供-受者相容的程度呈負相關(guān)的試驗。 

• 檢查部位 其他
• 科室 檢驗科
• 相關(guān)疾病 獲得性免疫缺陷綜合征
• 相關(guān)癥狀 免疫力下降 淋巴發(fā)育不全 免疫損害

混合淋巴細胞培養(yǎng)試驗正常值

• 形態(tài)計數(shù)法轉(zhuǎn)化率<10%。
  同位素計數(shù)法比較cpm得出P>0.05。 

混合淋巴細胞培養(yǎng)試驗臨床意義

• 異常結(jié)果：
  腎移植時，活體供腎者的轉(zhuǎn)化率應<10%;尸體供腎者的轉(zhuǎn)化率應為>10%。只能在同一批實驗中選用低反應配組。淋巴細胞轉(zhuǎn)化率10%者為不同兩個體間的組織是相容的。淋巴細胞混合培養(yǎng)試驗用以檢測患者的免疫狀態(tài)。T淋巴細胞數(shù)減少時，轉(zhuǎn)化率也降低?？勺鳛槠鞴俸凸撬枰浦驳呐湫头椒ㄖ唬脕磉x擇合適的供體。如轉(zhuǎn)化率高為供受者分歧用。轉(zhuǎn)化率低，移植后的成功率高。
  需要檢測人群：
  免疫力受損或者缺失的人群。 

混合淋巴細胞培養(yǎng)試驗檢查方法

• 1、供體淋巴細胞的制備：
  新鮮外周靜脈血按1∶1比例加在裝有比重為1.077的淋巴細胞分離液的離心管中，輕穩(wěn)加在液面上. 2000 r/min離心20 min，吸取中間霧狀淋巴細胞層. 生理鹽水洗滌2次. 臺盼藍染色，計數(shù)板計數(shù). 調(diào)整細胞密度為2×109/L，分成3管，各自離心,留取沉淀. 每管中加入250 μL絲裂霉素(終濃度50 mg/L)和1.75 mL生理鹽水，37℃水浴40 min， 生理鹽水離心洗滌2次. 用含100 mL/L胎牛血清的RPMI 1640液調(diào)整細胞密度為1×1010/L.加入抗體封閉抗原.標記為D。
  2、受體淋巴細胞的制備：
  新鮮外周靜脈血按1∶1比例加在裝有比重為1.077的淋巴細胞分離液的離心管中，輕穩(wěn)加在液面上. 2000 r/min離心20 min，吸取中間霧狀淋巴細胞層. 生理鹽水洗滌2次. 用含120 mL/L胎牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)液調(diào)整細胞密度為1×1010/L. 標記為R。
  3、混合淋巴細胞培養(yǎng)：
  將已制備好的R和D按如下分組加入96孔板，置37℃，50 mL/L CO2孵箱中培養(yǎng)24 h. A組：R 50 μL+D 50 μL;B組：R 50 μL+D 50 μL+IL?2純化中和mAb 15 μL;C組：R 50 μL+IL?2純化中和mAb 15 μL;D組：R 50 μL. 每組3個復孔，空白對照組為RPMI 1640培養(yǎng)液100 μL。 

混合淋巴細胞培養(yǎng)試驗注意事項

• 檢查時：本試驗可作為器官移植篩選供體的方法，轉(zhuǎn)化率低者移植成功率高，轉(zhuǎn)化率高者成功率低。