自然殺傷細(xì)胞活性概述

自然殺傷細(xì)胞又稱NK細(xì)胞，其主要的功能特征是對腫瘤細(xì)胞及病毒感染細(xì)胞具有非特異性的殺傷力，這種殺傷效應(yīng)不依賴抗體與補(bǔ)體，體外檢測NK細(xì)胞活性是診斷NK細(xì)胞功能及其與某些疾病關(guān)系的一個(gè)重要手段。 

• 檢查部位 其他
• 科室 內(nèi)科外科
• 相關(guān)疾病 獲得性免疫缺陷綜合征 小兒X-連鎖嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷病 阿米巴腸病
• 相關(guān)癥狀 感染性發(fā)熱

自然殺傷細(xì)胞活性正常值

• 自然釋放率要求<10%;自然殺傷率大約35%～85%，平均值60%。 

自然殺傷細(xì)胞活性臨床意義

• K細(xì)胞主要分布在腹腔滲出液，外周血、脾臟中;NK細(xì)胞主要分布在骨髓、外周血和脾臟中。臨床主要用于腫瘤、病毒感染、寄生蟲感染、自身免疫和移植免疫等病人，檢測其K、NK細(xì)胞殺傷功能，在維持和調(diào)節(jié)特異性免疫中起重要作用。 

自然殺傷細(xì)胞活性檢查方法

• (1)效靶細(xì)胞作用：將分離好的淋巴細(xì)胞懸液(效應(yīng)細(xì)胞)和標(biāo)記的K562細(xì)胞(靶細(xì)胞)按100∶1的比例加入平底塑料試管中，按表1操作，同時(shí)設(shè)自然釋放管(作為對照管)，每個(gè)標(biāo)本作了3個(gè)復(fù)管，最后用培養(yǎng)液使每管增至1ml，1500r/min離心，促進(jìn)效靶細(xì)胞結(jié)合，置37℃、5% CO2孵箱內(nèi)孵育18h。
  (2)酶促反應(yīng)：取出孵育試管，棄去各管上清液，剩下的細(xì)胞加一定濃度(2.2g/L)胰蛋白酶和DNA酶各0.1m1，混勻后37℃水浴30min，促使被攻擊的靶細(xì)胞釋放125IUdR，隨后各管立即加入0.8ml Hank液終止酶促反應(yīng)。混勻后1500r/min離心2min。
  (3)測放射強(qiáng)度和計(jì)算：用γ型計(jì)數(shù)器分別測各管(上清和細(xì)胞管)cpm值，按照公式計(jì)算。 

自然殺傷細(xì)胞活性注意事項(xiàng)

• (1)要求效/靶細(xì)胞比為100∶1，若比>100∶1，自然殺傷率不呈對數(shù)增加。且標(biāo)本用量亦大。
  (2)標(biāo)記靶細(xì)胞放置時(shí)間不宜過久。因隨時(shí)間延長死細(xì)胞增加，自然釋放率欠準(zhǔn)確。
  (3)標(biāo)記的125IUdR濃度要合適，要求125IUdR的放射性濃度為1.11×107Bq/ml，如濃度過低，標(biāo)記率<0.1cpm細(xì)胞，檢測結(jié)果受影響。