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胃液γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶概述
γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(gamma glutamyl transferase,γ-GT或GGT)是一種肽轉(zhuǎn)移酶,催化γ-谷氨?;霓D(zhuǎn)移,其天然供體是是谷胱甘肽(GSH),受體是L-氨基酸。γ-GT分子量為90kD,它在體內(nèi)的主要功能是參與“γ-谷氨酰循環(huán)”,與氨基酸通過(guò)細(xì)胞膜的轉(zhuǎn)運(yùn)及調(diào)節(jié)GSH的水平有關(guān)。人體各器官中按γ-GT含量多少依次為腎、前列腺、胰、肝、盲腸和腦。血清中的γ-GT活性主要來(lái)自肝、膽系統(tǒng),具有癌胚特性。但腎臟疾病時(shí),血清中該酶活性增高不明顯,這可能與經(jīng)尿排出有關(guān)。因此γ-GT主要用于消化系統(tǒng)疾病的輔助診斷。
胃液γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶正常值
空腹胃液 <8U。
胃液γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶臨床意義
>8U:胃癌。
胃液γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶檢查方法
胃液收集的方法:
在收集胃液前應(yīng)禁食、禁藥、禁煙小時(shí)以上,選擇在晨間,由醫(yī)師將消毒(蒸煮過(guò))的胃管經(jīng)鼻或口插入胃內(nèi),50-55厘米深度即可到達(dá)胃大彎黏液池;然后以50毫升注射器接于胃管外端抽吸胃液(或以負(fù)壓泵持續(xù)吸引),抽滿后注入容器內(nèi),再接管繼續(xù)抽吸;在收集過(guò)程中患者可以變換體位(仰、側(cè)、俯臥及坐位),盡量將胃內(nèi)液體抽吸干凈;拔管后記錄抽出的胃液量,貼標(biāo)簽于容器上送檢。
檢驗(yàn)操作方法:使用比色操作法。
1、緩沖液(pH 8.0,25℃):稱取Tris 9.1g,雙甘肽3.96g,溶于400ml蒸餾水中,再加蒸餾水至500ml,加氯仿1ml,置冰箱保存。
2、底物緩沖液(pH 7.8~7.9):稱取L-γ-谷氨酰-α-萘胺(無(wú)結(jié)晶水,MW272.3)217mg,置小燒杯中,加1mol/L HCl約4ml,待完全溶解后,再加上述Tris雙甘肽緩沖液90ml,于25℃用1mol/L HCl調(diào)節(jié)至pH 8.0±0.1,然后加水至100ml,置冰箱保存。
3、2g/L對(duì)氨基苯磺酸醋酸溶液(含醋酸20%),置冰箱保存。
4、1g/L亞硝酸鈉水溶液,置冰箱保存。
5、顯色劑:取4液4ml,加3液100ml混勻,當(dāng)天配制。
胃液γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶注意事項(xiàng)
比色法:
1、緩沖液種類不同,酶反應(yīng)的最適pH亦不同,以Tris緩沖液最為適宜。
2、底物緩沖液中游離的α-萘胺不穩(wěn)定,且對(duì)酶有抑制作用。故配制時(shí)應(yīng)注意溫度的影響,如試劑空白管吸光度>0.08,則應(yīng)將L-γ-谷氨酰-α-萘胺重結(jié)晶,以除去游離α-萘胺。
3、1g/L亞硝酸鈉溶液不穩(wěn)定,應(yīng)每周配制1次。
4、標(biāo)本易采用血清或體液,并可用EDTA-Na2(1mg/ml)抗凝血漿,其他抗凝劑可影響結(jié)果。
5、GGT較穩(wěn)定,室溫放置2天,4℃ 1周酶活力無(wú)變化,但65℃ 1min全部失活。