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血紅蛋白F細(xì)胞酸洗脫染色試驗(yàn)概述
HbF的抗堿性及抗酸性都較正常血紅蛋白(HbA)為強(qiáng),因此,血片經(jīng)酸洗脫后,含HbF的紅細(xì)胞因抗酸而不被脫色,能被伊紅染成紅色。含HbA或只含及少量HbF的紅細(xì)胞則被酸洗脫,僅留下紅細(xì)胞膜的空影。
血紅蛋白F細(xì)胞酸洗脫染色試驗(yàn)正常值
著色細(xì)胞:0-<1%?!?br /> 新生兒:2/3。
血紅蛋白F細(xì)胞酸洗脫染色試驗(yàn)臨床意義
(1) 多數(shù)紅細(xì)胞染成紅色:β-地中海貧血重癥型?!?br />
(2) 少數(shù)紅細(xì)胞染成紅色:β-地中海貧血輕癥型、再生障礙性貧血、溶血性貧血?!?br />
(3) 染色深:遺傳性HbF增多癥純合子型?!?br />
(4) 染色淺:遺傳性HbF增多癥雜合子型。
(5) 染色深淺不均勻:β-地中海貧血輕癥型。
血紅蛋白F細(xì)胞酸洗脫染色試驗(yàn)檢查方法
1、按常規(guī)法制備血涂片,自然干燥1h,再用80%乙醇固定5min(檸檬酸鹽抗凝血在4℃冰箱內(nèi)保存3天可以使用),水洗待干。
2、將固定后血膜放37℃,pH3.3的磷酸鹽檸檬酸緩沖液中,保溫浸洗5min。
3、沖洗干燥后,在蘇木素染色液中染白細(xì)胞1min,以免誤認(rèn)為陽(yáng)性紅細(xì)胞。
4、水洗后,用伊紅染液染紅細(xì)胞1min,再水洗,干后鏡檢。
5、在油鏡下,含有Hb F的紅細(xì)胞被伊紅染液染成鮮紅色,為陽(yáng)性紅細(xì)胞;僅留下淡影的細(xì)胞膜為陰性紅細(xì)胞。計(jì)數(shù)1000個(gè)紅細(xì)胞中陽(yáng)性紅細(xì)胞所占百分率。
血紅蛋白F細(xì)胞酸洗脫染色試驗(yàn)注意事項(xiàng)
1、血片制成后,在2h內(nèi)染色,否則可出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)。要求涂片薄,細(xì)胞平鋪分散。
2、緩沖液的pH、溫度、洗脫時(shí)間應(yīng)嚴(yán)格控制,否則影響測(cè)定結(jié)果。
3、也可用稀釋瑞氏染色液作對(duì)比染色。