β-內(nèi)酰胺酶概述

 β-內(nèi)酰胺酶是指能催化水解生物分子中β-內(nèi)酰胺環(huán)中的的酰胺鍵的滅活酶。細(xì)菌產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶是細(xì)菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥的主要機(jī)制。β-內(nèi)酰胺酶類抗生素包括青霉素類，頭孢菌素類，非典型β-內(nèi)酰胺類等，是品種最多，研究進(jìn)展最快，臨床應(yīng)用最廣泛的一大類藥物。

• 檢查部位 全身
• 科室 內(nèi)科體檢、保健科
• 相關(guān)疾病 腸桿菌肺炎 肺炎鏈球菌性肺炎 小兒肺炎鏈球菌肺炎
• 相關(guān)癥狀 逆行性細(xì)菌感染 細(xì)菌感染

β-內(nèi)酰胺酶正常值

• 體內(nèi)菌群的種類和比例正常，人體處于動(dòng)態(tài)平衡。 

β-內(nèi)酰胺酶臨床意義

• 細(xì)菌耐藥性的機(jī)制：
  1、滅活酶――主要為β內(nèi)酰胺酶(200多種)，使抗生素失效。
  2、靶位改變――與抗生素結(jié)合靶位的改變，使抗生素作用下降。
  3、細(xì)菌膜通透性的改變――使抗生素不能或很少進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)到達(dá)作用靶位。
  細(xì)菌耐藥性的發(fā)展從醫(yī)院內(nèi)菌株(如腸桿菌科、金黃色葡萄球菌)到醫(yī)院外菌株(如肺炎鏈球菌、化膿性鏈球菌、淋球菌)，其耐藥性從對(duì)單種藥物耐藥發(fā)展至多重耐藥，例如金黃色葡萄球菌對(duì)青霉素耐藥；ESBL菌株對(duì)多種常用抗生素耐藥。
  異常結(jié)果腸桿菌科、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、化膿性鏈球菌、淋球菌等感染，但是用抗生素?zé)o效或者效果不明顯，細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性。
  需要檢查的人群有上述情況的患者。 

β-內(nèi)酰胺酶檢查方法

• β-內(nèi)酰胺酶的檢測(cè)
  臨床標(biāo)本中分離金黃色葡萄球菌、流感嗜血桿菌、淋病奈瑟菌以及最近發(fā)現(xiàn)的腸球菌屬少數(shù)菌株對(duì)青霉素、氨芐青霉素出現(xiàn)耐藥。由于上述菌株產(chǎn)生 β-內(nèi)酰胺酶水解前述抗生素。檢測(cè)該酶有下列方法：
  (一)微生物活性消失法
  此法是以一株對(duì)青霉素高度敏感的枯草芽胞桿菌的指示菌，如待檢菌株產(chǎn)生β內(nèi)酰胺酶，破壞了青霉素，則在劃線兩邊有枯草芽胞菌生長(zhǎng)，否則指示菌仍呈很大抑菌環(huán)。
  (二)淀粉-碘測(cè)定法
  β內(nèi)酰胺酶破壞β內(nèi)酰胺環(huán)，碘與被打開β內(nèi)酰胺環(huán)結(jié)合，使藍(lán)色的淀粉-碘復(fù)合物轉(zhuǎn)變成無色。
  方法：用pH6.0磷酸緩沖液配制青霉素懸液 6000μg/ml，取該液0.1 ml置于微量稀釋板凹孔中，挑選檢測(cè)菌株數(shù)個(gè)菌落混懸于其中，搖動(dòng)30min，靜置室溫中1h，加淀粉液2滴，再加碘液1滴，混合，立即觀察顏色變化，陽(yáng)性者當(dāng)加入碘液后，首先立即出現(xiàn)藍(lán)色、如在10min內(nèi)消失藍(lán)色，提示該菌產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶。
  (三)酸測(cè)量法
  青霉素被β-內(nèi)酶胺酶水解后成青霉素酸，pH值下降6.8以下，用酚紅指示劑，由紅(紫)色 (原液：枸櫞酸緩沖液pH8.5) → 黃色(pH6.8以下)。
  (四)頭孢硝基噻吩顯色反應(yīng)
  頭孢硝基噻吩(Nitrocefin)的β-內(nèi)酰胺環(huán)被β-內(nèi)酰胺酶打開，基質(zhì)由黃色變成紅色。
  液體方法：10mg頭孢硝基噻吩溶解于lml的二甲基亞砜中，然后用0.1mol/L PBS(pH7.0)再稀釋 1：20，最后濃度為500μg/m1，溶液呈黃或淡橙色，保存4～10℃，可用幾個(gè)星期。取該溶液0.05ml置放于微量稀釋板凹孔中或小試管中，挑取被試菌落，制成濃厚懸液，與凹孔中基質(zhì)液混和，室溫10～ 30min，頭孢硝基噻吩由黃變成紅色為陽(yáng)性，若顯色不明顯，觀察可延長(zhǎng)6h。
  有報(bào)道紙片法用于流感嗜血桿菌和淋病奈瑟菌檢測(cè)β-內(nèi)酰胺酶的結(jié)果是準(zhǔn)確的，但對(duì)于某些菌株產(chǎn)生少量而與菌細(xì)胞緊密結(jié)合的β-內(nèi)酰胺酶，如腐生葡萄球菌等，用液體法檢測(cè)更好。上述任何一種檢測(cè)方法都應(yīng)用質(zhì)量控制。 

β-內(nèi)酰胺酶注意事項(xiàng)

• 1、檢查前禁忌：注意正常的生活飲食習(xí)慣，注意個(gè)人衛(wèi)生。
  2、檢查時(shí)要求：積極配合醫(yī)生。
  不合宜人群： 沒有。