腸血管活性肽概述
血管活性腸肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)由28個(gè)氨基酸組成,主要是由腸道神經(jīng)元釋放,在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中也大量存在,為重要的腦腸肽。胰腺中也有很多VIP能神經(jīng)纖維。脂肪餐和迷走神經(jīng)刺激均可引起VIP的釋放。另外,腸缺血也可刺激其釋放。它有著廣泛的生物活性,如擴(kuò)張心、腦、肝血管,調(diào)節(jié)腦血流量,降低肺動(dòng)脈壓,降低血壓,松弛支氣管平滑肌,調(diào)節(jié)中樞體溫、睡眠,刺激催乳素釋放等。在消化系統(tǒng)的主要作用是舒張腸道平滑肌,并使食管下段括約肌、Oddi括約肌、腸道平滑肌、肛門內(nèi)括約肌松弛。
腸血管活性肽正常值
RIA法:20-53ng/L(20-53pg/ml)。
腸血管活性肽臨床意義
升高:WDHA綜合征(水瀉低血鉀癥伴胰島細(xì)胞腺瘤綜合征)、短腸綜合征、尿毒癥、胰島素瘤等。
腸血管活性肽檢查方法
本法分三個(gè)步驟,即抗原與抗體反應(yīng)、B和F分離和放射性測(cè)定。
(1)抗原與抗體反應(yīng):將標(biāo)本(非標(biāo)記抗原)、標(biāo)記抗原和抗血清順序定量加入小試管內(nèi),置室溫(15~30℃)作用24h,使其充分競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合。
(2)B、F分離:分離技術(shù)多種多樣,常用沉淀法。①第二抗體沉淀法:又稱雙抗體法,在受檢抗原與第一抗體特異性反應(yīng)后加入相應(yīng)的第二抗體,使形成的抗原-第一抗體-第二抗體的復(fù)合物共沉,一經(jīng)離心即可使結(jié)合標(biāo)記抗原B與游離抗原F分離。本法是特異性沉淀,分離完全,非特異性結(jié)合力低。但第二抗體用量較大,成本較高。此外血清濃度、抗凝劑的有無因素可在一定程度上影響結(jié)果。②聚乙二醇(PEG)沉淀法:使蛋白質(zhì)處于等電點(diǎn)狀態(tài),水化層破壞而導(dǎo)致蛋白質(zhì)沉淀。本法優(yōu)點(diǎn)是PEG制備方便、價(jià)廉、分離快速,缺點(diǎn)是非特異沉淀物較多,分離不完全。③第二抗體-聚乙二醇沉淀法:本法既有PEG法的快速沉淀優(yōu)點(diǎn),且保持第二抗體特異性沉淀的作用,又減少第二抗體用量,并降低PEG濃度,使非特異沉淀物減少。④活性炭吸附法:利用活性炭表面活性將小分子的游離部分吸附。如在活性炭表面涂上一層葡聚糖,使它表面具有一定孔徑的網(wǎng)眼,從而允許小分子游離抗原或半抗原逸入而被吸附,而大分子復(fù)合物則被排斥在外。在抗原與抗體反應(yīng)后,加入葡聚糖-活性炭,放置5~10min,使游離抗原吸附在活性炭顆粒上,離心使顆粒沉淀,上清液中含有結(jié)合的標(biāo)記抗原。
(3)放射性強(qiáng)度測(cè)定:B和F分離后,即可測(cè)定其放射性強(qiáng)度。測(cè)量?jī)x器有兩類:液體閃爍計(jì)數(shù)儀(測(cè)β射線)和晶體閃爍計(jì)數(shù)儀(測(cè)γ射線)。計(jì)數(shù)單位是探測(cè)器輸出的電脈沖數(shù),單位為cpm(脈沖數(shù)/min)。
每次測(cè)定均需作一標(biāo)準(zhǔn)曲線圖,以標(biāo)準(zhǔn)抗原的不同濃度為橫坐標(biāo),以測(cè)到的相應(yīng)放射性強(qiáng)度為縱坐標(biāo)作圖。放射性強(qiáng)度可任選B或F,亦可采用計(jì)算值B/B+F、B/F或B/B0。標(biāo)本應(yīng)作雙份測(cè)定,取其平均值,在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的受檢抗原濃度。
腸血管活性肽注意事項(xiàng)
此外,VIP還能刺激膽酸非依賴性膽汁的分泌,促進(jìn)糖原分解,使血糖升高。