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血栓調(diào)節(jié)蛋白抗原

血栓調(diào)節(jié)蛋白抗原概述

血栓調(diào)節(jié)蛋白(thrombomodulim,TM)是具有凝集素樣活性的新一類細(xì)胞粘附分子的成員。TM是凝血酶的受體,其功能類似于鈣粘蛋白,已知其在人類多種正常組織中表達(dá),亦可表達(dá)于許多腫瘤組織中,但對(duì)其生理和病理學(xué)意義還知之甚少。 

血栓調(diào)節(jié)蛋白抗原正常值

  • RIA法:20-35μg/L(血漿)。 

血栓調(diào)節(jié)蛋白抗原臨床意義

  • 升高:糖尿病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)、血栓性血小板減少性紫癜、急性心肌梗死、腦梗塞、肺栓死、閉塞性脈管炎。 

血栓調(diào)節(jié)蛋白抗原檢查方法

  • 本法分三個(gè)步驟,即抗原與抗體反應(yīng)、B和F分離和放射性測(cè)定。
    (1)抗原與抗體反應(yīng):將標(biāo)本(非標(biāo)記抗原)、標(biāo)記抗原和抗血清順序定量加入小試管內(nèi),置室溫(15~30℃)作用24h,使其充分競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合。
    (2)B、F分離:分離技術(shù)多種多樣,常用沉淀法。①第二抗體沉淀法:又稱雙抗體法,在受檢抗原與第一抗體特異性反應(yīng)后加入相應(yīng)的第二抗體,使形成的抗原-第一抗體-第二抗體的復(fù)合物共沉,一經(jīng)離心即可使結(jié)合標(biāo)記抗原B與游離抗原F分離。本法是特異性沉淀,分離完全,非特異性結(jié)合力低。但第二抗體用量較大,成本較高。此外血清濃度、抗凝劑的有無因素可在一定程度上影響結(jié)果。②聚乙二醇(PEG)沉淀法:使蛋白質(zhì)處于等電點(diǎn)狀態(tài),水化層破壞而導(dǎo)致蛋白質(zhì)沉淀。本法優(yōu)點(diǎn)是PEG制備方便、價(jià)廉、分離快速,缺點(diǎn)是非特異沉淀物較多,分離不完全。③第二抗體-聚乙二醇沉淀法:本法既有PEG法的快速沉淀優(yōu)點(diǎn),且保持第二抗體特異性沉淀的作用,又減少第二抗體用量,并降低PEG濃度,使非特異沉淀物減少。④活性炭吸附法:利用活性炭表面活性將小分子的游離部分吸附。如在活性炭表面涂上一層葡聚糖,使它表面具有一定孔徑的網(wǎng)眼,從而允許小分子游離抗原或半抗原逸入而被吸附,而大分子復(fù)合物則被排斥在外。在抗原與抗體反應(yīng)后,加入葡聚糖-活性炭,放置5~10min,使游離抗原吸附在活性炭顆粒上,離心使顆粒沉淀,上清液中含有結(jié)合的標(biāo)記抗原。
    (3)放射性強(qiáng)度測(cè)定:B和F分離后,即可測(cè)定其放射性強(qiáng)度。測(cè)量?jī)x器有兩類:液體閃爍計(jì)數(shù)儀(測(cè)β射線)和晶體閃爍計(jì)數(shù)儀(測(cè)γ射線)。計(jì)數(shù)單位是探測(cè)器輸出的電脈沖數(shù),單位為cpm(脈沖數(shù)/min)。
    每次測(cè)定均需作一標(biāo)準(zhǔn)曲線圖,以標(biāo)準(zhǔn)抗原的不同濃度為橫坐標(biāo),以測(cè)到的相應(yīng)放射性強(qiáng)度為縱坐標(biāo)作圖。放射性強(qiáng)度可任選B或F,亦可采用計(jì)算值B/BF、B/F或B/B0。標(biāo)本應(yīng)作雙份測(cè)定,取其平均值,在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的受檢抗原濃度。 

血栓調(diào)節(jié)蛋白抗原注意事項(xiàng)

  • 60歲以上患者胃癌組織中TM表達(dá)明顯>60歲以下者。 

血栓調(diào)節(jié)蛋白抗原相關(guān)問答

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