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載脂蛋白AⅡ

載脂蛋白AⅡ概述

載脂蛋白是血漿脂蛋白部分各類脂蛋中均含有一種和幾種不同特異性載脂蛋白。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的載脂蛋白有20余種。其中主要有aPOA1、AⅡ、B-100、B48、CⅠ、CⅡ、CⅢ、D、E等。 

載脂蛋白AⅡ正常值

  • 250~520mg/L。 

載脂蛋白AⅡ臨床意義

  • 高于正常值:
    暫無相關(guān)資料。
    低于正常值:
    降低:冠心病、糖尿病、腎病綜合征、遺傳性ApoA-Ⅰ缺乏癥(Tangier病)、家族性低α-脂蛋白血癥、魚眼病、重度營養(yǎng)不良、肝炎活動期、肝功能低下。 

載脂蛋白AⅡ檢查方法

  • 靜脈抽血。 

載脂蛋白AⅡ注意事項

  • (1)免疫透射比濁法:
    ①關(guān)于抗血清:比濁測定與其他方法相比對抗血清的要求更高。比濁法以用多克隆抗體為宜??寡逯斜仨毑缓s抗體。必須十分重視從人血清中提取的apoA-Ⅱ達(dá)到免疫純、色譜純與電泳純,這不是一般實驗室都能做到的??寡逍r(滴度)不可低于16。目前國內(nèi)某些商品試劑中,apoA-Ⅱ抗血清效價極低,選購試劑盒時必須注意。如果沒有在選購前鑒定抗血清質(zhì)量的經(jīng)驗,應(yīng)請有條件的單位鑒定之。
    ②上法中標(biāo)本(血清)稀釋200倍是為了便于手工操作(加樣100μl),如有精密加樣器,可作20倍稀釋(用10μl)。為了適合不同實驗室的條件(如不同類型的自動化儀器),作適當(dāng)修改時應(yīng)注意抗原抗體的比例,必須十分注意反應(yīng)體系中不可有抗原過量,線性上限不可低于2.5g/L。換言之,抗血清用量必須充裕,否則標(biāo)本中apoA-Ⅰ高水平時測出結(jié)果偏低。目前國內(nèi)某些商品試劑盒不但抗血清效價過低,操作中所定標(biāo)本用量又過大(如3~5μl),抗體明顯不足,測出結(jié)果必然不準(zhǔn)確。
    ③為了達(dá)到準(zhǔn)確測定的目的,apoA-Ⅱ與B比濁測定(終點法)中必須作校準(zhǔn)曲線計算結(jié)果。一定范圍(低標(biāo)本用量)濃度(X)與濁度(Y)基本上成直線關(guān)系,直線回歸計算出在Y軸上有一定截距(A值<0.1),所以用單點校準(zhǔn)計算結(jié)果偏差較大,使測出結(jié)果不能準(zhǔn)確反映濃度的高低(高的偏低,低的偏高)。千萬不要因為單點法簡便而忽略了測定的準(zhǔn)確性。無論用何種自動化儀器,必須先試作校準(zhǔn)曲線。如果在所用儀器及特定條件下反復(fù)測試,回歸線的截距不明顯時,才能采用單點校準(zhǔn)法。標(biāo)本用量在3~5&mu;l時,即使加大抗血清用量,濃度與濁度也不成直線關(guān)系,只能用曲線直線化轉(zhuǎn)換后計算。
    ④主要干擾因素是血清本身的混濁(如高脂血清),用超離心或脂肪酶水解等標(biāo)本預(yù)處理方法都不實用。用表面活性劑消濁的作用也有限,所以在測定中必須作標(biāo)本空白管。除了自動分析中可采用兩點法外,手工法用單一試劑而不扣除標(biāo)本空白的做法是錯誤的。為了減少基質(zhì)效應(yīng)對濁度反應(yīng)的影響,必須用定值血清作校準(zhǔn)物。此外,塵埃粒子、比濁皿劃痕等干擾也必須排除。
    ⑤有的商品試劑盒(包括某些進(jìn)口產(chǎn)品)所附校準(zhǔn)血清定值不準(zhǔn)確,是誤差的重要來源。
    (2)火箭電泳法:
    ①抗原稀釋倍數(shù)與抗血清用量的選擇,應(yīng)以火箭峰清晰、校準(zhǔn)曲線斜率適中并成直線為宜。本法同時測定apoA-Ⅱ與apoB,應(yīng)調(diào)整兩種抗血清用量,使二者峰高有區(qū)別,apoB峰高不小于1cm。
    ②不同種類來源的抗血清(如兔與羊),在等效價的情況下進(jìn)行試驗,結(jié)果會有差異。apoA-Ⅰ測定以兔抗血清為好。用兔血清時峰形尖細(xì),而羊血清所產(chǎn)生的峰粗,峰尖圓鈍,有時在峰頂前出現(xiàn)虛影。校準(zhǔn)血清所作校準(zhǔn)曲線斜率也不同。但不論用何種抗血清,定量結(jié)果差別不大。
    ③在一定條件下電泳,不同稀釋度校準(zhǔn)血清的峰高不會有明顯變動,校準(zhǔn)曲線斜率基本一致。如標(biāo)本峰高超出校準(zhǔn)曲線范圍時,應(yīng)調(diào)整標(biāo)本稀釋倍數(shù)后重測。板間CV通常小于5%。
    ④火箭電泳結(jié)果可以用染色法或直接肉眼觀察可見的火箭峰。前者用標(biāo)本少,節(jié)省抗血清,但如適當(dāng)增加標(biāo)本及抗血清用量,不染色更為方便。所用瓊脂糖應(yīng)為標(biāo)準(zhǔn)電滲或低電滲的,凝膠中加入適量葡聚糖或聚乙二醇可使火箭峰更清晰。
    ⑤火箭峰的測量可以計算面積或峰高,面積是峰高乘以峰寬(峰半高處的寬度)。測量精度最好能達(dá)0.1mm。須用機(jī)械或電子放大設(shè)備。標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)峰高以1~4cm為宜。
    ⑥本法適用于少量標(biāo)本分析。也適用于apoAⅡ、CⅠ、CⅡ、CⅢ、D、E及Lp(a)測定。 

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