紅細胞滲透脆性試驗(ROFT)概述
正常紅細胞為雙凹圓盤形,在低滲鹽水中溪水膨脹的適應性大,一般可增加70%的體積而不破裂。紅細胞滲透脆性是測定紅細胞對不同低滲鹽水溶液的抵抗力。這種抵抗力與紅細胞表面積與體積的比值有關。表面積大的體積小者對低滲鹽水抵抗力較大(脆性低);反之則抵抗力較小(脆性增加)。本試驗對確定溶血性貧血和鑒別黃疸的種類有一定的參考價值。
紅細胞滲透脆性試驗(ROFT)正常值
開始溶血:4.2-4.6g/L NaCl (71.8-78.6mmoL/L)
完全溶血:2.8-3.29g/L NaCl (47.9-54.7mmoL/L)。
紅細胞滲透脆性試驗(ROFT)臨床意義
1.脆性增加:試驗結(jié)果與正常對照比較,提高0.04%者即有意義。 見于遺傳性球形紅細胞增多癥、自身免疫性溶血性貧血伴球形紅細胞增多癥,也可見于遺傳性橢圓形紅細胞增多癥和部分遺傳性口形紅細胞增多癥患者。
2.脆性減低: 見于缺鐵性貧血、地中海性貧血、鏈狀細胞貧血、靶形紅細胞增多癥、血紅蛋白增多癥、脾切除術后、肝臟疾病、阻塞性黃疸等。
紅細胞滲透脆性試驗(ROFT)檢查方法
1、制備不同濃度的NaCl溶液。先配置1%濃度的低滲NaCl溶液100ml,然后去口徑相同的干凈試管12支,編號排列在試管架上,按下表分別向各試管內(nèi)加入1%NaCl溶液和蒸餾水后混勻,配置12種0.68%~0.24%不同濃度的低滲NaCl溶液。
2、分別配置0.85%濃度的NaCl溶液、1.9%濃度的尿素溶液。另取3支小試管,編號13~15,分別盛2.5ml 0.85%NaCl溶液。1.9%尿素溶液和蒸餾水。
3、碘酒、酒精消毒皮膚后用滅菌干燥的、肝素濕潤的注入器從肘正中靜脈取2ml,利己混勻,將其中1ml加入試管,余血一次向15支試管內(nèi)各加入1滴,輕輕混勻。
4、觀察13、14、15管的變化,其余12管在室溫下靜置1小時,然后觀察混合液的顏色和透明度。
(1)試管內(nèi)液體完全變成透明紅色,說明紅細胞全部破裂,稱完全溶血。
(2)試管內(nèi)液體下層為渾濁紅色,上層為透明紅色,表示部分虹吸包破裂,稱不完全溶血。
(3)試管內(nèi)下層為渾濁紅色,上層為無色透明,說明紅細胞全部沒有破裂。
5、記錄試驗結(jié)果。包括受試者姓名和紅細胞滲透脆性范圍(即最小抵抗力的NaCl溶液濃度和最大抵抗力的NaCl溶液濃度)以及13~15管的結(jié)果。
6、取第6管和第13管混合液各1滴于載玻片上,蓋上蓋玻片,在顯微鏡下觀察紅細胞形態(tài)。
紅細胞滲透脆性試驗(ROFT)注意事項
(1)每次檢查均應有正常對照,正常對照與被檢者相差0.04%,即有臨床意義。
(2)試劑配制時要求準確,一二個月要更換1次試劑,因水蒸發(fā)可致NaCl濃度增加。
(3)取血時應防止紅細胞破壞。
(4)抗凝劑以肝素為宜若用去纖維蛋白血,檸檬酸或草酸鹽,可以增加離子強度影響滲透壓。
(5)如開始及完全溶血的結(jié)果不易判斷,可以離心沉淀后進行觀察。
(6)地中海貧血的滲透脆性降低,應進行低濃度NaCl溶液的檢查。
(7)嚴重貧血者,要把RBC配成50%濃度,黃疸者要洗紅細胞。
(8)血標本在冰箱中保存不得超過6h。