2015年5月29日,中國(guó)科學(xué)院生物物理所王江云與化學(xué)研究所夏安東等人合作在JournaloftheAmericanChemicalSociety發(fā)表了最新研究論文報(bào)告了他們?cè)诨蛎艽a子擴(kuò)展模擬光合作用研究方面的最新研究成果。在這篇題為“UltrafastPhoto-inducedElectronTransferinGreenFluorescentProteinBearingaGeneticallyEncodedElectronAcceptor”的最新研究成果中,科學(xué)家通過(guò)基因編碼的方法將一系列電子受體苯丙氨酸類似物引入綠色熒光蛋白,利用飛秒瞬態(tài)吸收光譜研究了綠色熒光蛋白中的光致電子轉(zhuǎn)移過(guò)程,為研究生物大分子中的光致電子轉(zhuǎn)移現(xiàn)象,及復(fù)雜還原酶的理性設(shè)計(jì)提供了有力工具。
該研究將氟代硝基苯丙氨酸和間硝基苯丙氨酸兩種電子受體非天然氨基酸通過(guò)基因密碼子擴(kuò)展手段定點(diǎn)插入到綠色熒光蛋白(GFP),首次實(shí)現(xiàn)了利用電子受體非天然氨基酸研究綠色熒光蛋白中的快速光致電子轉(zhuǎn)移過(guò)程,并且與化學(xué)所夏安東研究組合作,利用飛秒瞬態(tài)光譜測(cè)量到電子轉(zhuǎn)移發(fā)生在皮秒范圍(接近光系統(tǒng)I中最快的電子轉(zhuǎn)移步驟)。利用晶體結(jié)構(gòu)研究測(cè)量了發(fā)色團(tuán)到電子受體之間的距離,揭示了該電子轉(zhuǎn)移過(guò)程是距離依賴的過(guò)程(與光系統(tǒng)I一致)。并且該電子受體非天然氨基酸的氧化還原電勢(shì)與生物體內(nèi)重要的氧化還原產(chǎn)物NAD(P)H,鐵硫中心A和鐵硫中心B類似,因此可為利用合成生物學(xué)手段模擬復(fù)雜還原酶(光系統(tǒng)I,氫酶,固氮酶等)進(jìn)而研究其機(jī)制和模擬其功能提供新的方法。并且引入的氟原子還可用于對(duì)電子轉(zhuǎn)移進(jìn)行EPR和NMR測(cè)定。
電子轉(zhuǎn)移(ET)是生物體中最基本的生化過(guò)程,例如光合系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)中的氧化還原反應(yīng)均為電子傳遞過(guò)程。研究者一直在尋求利用生物元件實(shí)現(xiàn)對(duì)復(fù)雜系統(tǒng)中電子轉(zhuǎn)移及光致電荷分離進(jìn)行高效可控的模擬,而如何基因編碼有效的電子受體是合成生物學(xué)中的主要瓶頸。已知自然界中的天然氨基酸均為電子供體,而目前基因編碼的用于研究電子傳遞過(guò)程的非天然氨基酸也均為電子供體。雖然也有金屬螯合能力的非天然氨基酸可作為電子受體,但由于銅離子有不能進(jìn)入蛋白質(zhì)內(nèi)部,毒性及環(huán)境敏感等原因而無(wú)法被推廣。
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