聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)介紹:
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)是一種在體外快速擴(kuò)增特定基因或DNA序列的方法,故又稱為基因的體外擴(kuò)增法。PCR技術(shù)類似于DNA的天然復(fù)制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)正常值:
體內(nèi)菌群的種類和比例正常,人體處于動(dòng)態(tài)平衡健康狀態(tài)。
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)臨床意義:
PCR能快速特異擴(kuò)增任何已知目的基因或DNA片段,并能輕易在皮克(pg)水平起始DNA混合物中的目的基因擴(kuò)增達(dá)到納克、微克、毫克級的特異性DNA片段。因此,PCR技術(shù)一經(jīng)問世就被迅速而廣泛地用于分子生物學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域。
異常結(jié)果:各種疾病所致的異常,例如梅毒。
?、僖黄诿范?。即硬下疳,潛伏期2~4周,外生殖器部位發(fā)生暗紅色硬腫塊、淺潰瘍,有軟骨樣硬度,周圍淋巴結(jié)腫大。
?、诙诿范尽T谝黄诿范?~2個(gè)月之后,全身皮膚、粘膜發(fā)生對稱泛發(fā)皮疹、斑疹、丘疹、膿皰疹等。粘膜可發(fā)生粘膜斑、扁平濕疣,傳染性強(qiáng)。
?、廴诿范尽0l(fā)生在感染后2~3年乃至10年,皮膚為樹膠樣腫,還可涉及骨、關(guān)節(jié)、心、血管,表現(xiàn)為主動(dòng)脈炎、主動(dòng)脈瓣閉鎖不全和主動(dòng)脈瘤等,侵及神經(jīng)為脊髓癆,全身麻痹(麻痹性癡呆)等等。
需要檢查的人群:疑似某種特定的疾病病人,進(jìn)行分子特異性檢查。
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)注意事項(xiàng):
不合宜人群:沒有
檢查前禁忌:注意正常的生活飲食習(xí)慣,注意個(gè)人衛(wèi)生。
檢查時(shí)要求:積極配合醫(yī)生
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢查過程:
PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成:
①模板DNA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時(shí)間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備;
?、谀0錎NA與引物的退火(復(fù)性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對結(jié)合;
?、垡锏难由欤篋NA模板--引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應(yīng)原料,靶序列為模板,按堿基配對與半保留復(fù)制原理,合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過程,就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”,而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個(gè)循環(huán)需2~4分鐘,2~3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬倍。到達(dá)平臺期(Plateau)所需循環(huán)次數(shù)取決于樣品中模板的拷貝。
PCR技術(shù)敏感性高,特異性強(qiáng),操作簡便、快速,在生命科學(xué)研究、食品衛(wèi)生、醫(yī)療、法醫(yī)及環(huán)境監(jiān)測等諸多方面都具有重要的應(yīng)用價(jià)值。
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)一般費(fèi)用:
120元