miR-519家族對人牙周膜細胞內(nèi)MMP-2表達的影響
摘要:研究指出,miR-519家族可負性調(diào)控人牙周膜細胞內(nèi)MMP-2基因的表達。該文發(fā)表在2014年第03期《現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志》上。
近日,第三軍醫(yī)大學(xué)新橋醫(yī)院口腔科研究人員發(fā)表論文,旨在探討miR-519家族對人牙周膜細胞內(nèi)MMP-2表達的影響。研究指出,miR-519家族可負性調(diào)控人牙周膜細胞內(nèi)MMP-2基因的表達。該文發(fā)表在2014年第03期《現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志》上。
構(gòu)建MMP-2雙熒光素酶野生型和突變型表達載體,應(yīng)用TargetScan和miRanda等軟件預(yù)測作用于MMP-23'-UTR靶向miRNA,利用雙熒光素酶報告基因檢測系統(tǒng)驗證靶向MMP-23'-非翻譯區(qū)(3'-UTR)的miRNA。用qRT-PCR和Westernblot技術(shù)檢測miR-519家族對MMP-2表達的調(diào)控。
軟件預(yù)測在MMP-2的3'-UTR位置有一個與miR-519家族的結(jié)合位點;mimics-miR-519實驗組與轉(zhuǎn)染controlmiR組和突變型載體組相比,能明顯降低MMP-2載體的熒光素酶活性(P<0.05)。qRT-PCR結(jié)果顯示實驗組的miR-519較對照組表達顯著增高(P<0.01)。qRT-PCR、Westernblot結(jié)果表明miR-519抑制MMP-2mRNA和蛋白水平表達(P<0.05)。