傳統(tǒng)的結(jié)核病診斷方法多為“痰抗菌涂片”、“結(jié)核菌素試驗(yàn)”和“結(jié)核抗體試驗(yàn)”,這些方法靈敏性和特異性均較差;而“結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)”作為診斷結(jié)核的金標(biāo)準(zhǔn),特異性雖高但敏感性低,并且培養(yǎng)周期長,因此急需尋求一種快速、準(zhǔn)確的判斷人體是否感染結(jié)核桿菌的檢測方法。
T細(xì)胞斑點(diǎn)(T-SPOT)實(shí)驗(yàn)的出現(xiàn),為臨床早期發(fā)現(xiàn)結(jié)核病提供了新的方法。T-SPOT實(shí)驗(yàn)結(jié)合了酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)(即ELISPOT技術(shù))與γ-干擾素釋放試驗(yàn),通過檢測受結(jié)核分枝桿菌抗原刺激而活化的效應(yīng)T細(xì)胞來診斷結(jié)核感染。結(jié)核感染后體內(nèi)長期存在抗原特異性T細(xì)胞,當(dāng)再次遇到抗原刺激時,能迅速活化增殖,釋放γ-干擾素。實(shí)驗(yàn)中利用ESAT6和CFP10兩種結(jié)核特異性抗原刺激外周血中結(jié)核特異性T淋巴細(xì)胞分泌γ-干擾素,通過ELISPOT方法檢測γ-干擾素的釋放水平(即斑點(diǎn)的多少),從而判斷機(jī)體是否感染了結(jié)核桿菌。ESAT6和CFP10均來自結(jié)核分枝桿菌基因組RD1區(qū)域,且僅結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群存在RD1區(qū),所有的卡介苗和大多數(shù)環(huán)境分枝桿菌均缺失該區(qū)域。因此,該檢測不受卡介苗接種、環(huán)境分枝桿菌感染的影響,特異性強(qiáng),是目前早期發(fā)現(xiàn)結(jié)核病最有效的檢測手段。
該項目操作簡便、檢測周期短,標(biāo)本采用外周血或胸、腹水,非常方便,且具有傳統(tǒng)方法不具備的諸多優(yōu)點(diǎn),如:可以通過檢測治療前后斑點(diǎn)數(shù)的多少來進(jìn)行抗癆療效的判斷,還可對肺外結(jié)核進(jìn)行輔助診斷,且不受糖尿病、艾滋病等免疫力低下疾病或激素、免疫相關(guān)藥物的影響,大于10個致敏T淋巴細(xì)胞就能檢測出,靈敏度非常高。最重要的是,可用于兒童肺結(jié)核的輔助診斷,因?yàn)槟承﹥和谓Y(jié)核患兒干咳不排痰,用傳統(tǒng)方法幾乎無法診斷,用T-SPOT實(shí)驗(yàn)即可解決該問題。目前此項檢測在風(fēng)濕免疫科、感染科、消化科、腫瘤科等諸多臨床科室應(yīng)用廣泛,如檢測到潛伏感染的結(jié)核桿菌將提示臨床禁用或慎用免疫相關(guān)生物制劑。
(實(shí)習(xí)編輯:羅冉)
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適用于妊娠早期診斷。
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